衰老相关β-半乳糖苷酶染色试剂盒

细胞衰老时,细胞内的衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-asso***tedβ-galactosidase,sa-β-gal)的活性上调。本试剂盒以x-gal

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    福建 厦门市

  • 产品类别:化学试剂
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  • 发布时间:

    2021-07-09 08:38

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详情介绍

细胞衰老时,细胞内的衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-asso***tedβ-galactosidase,sa-β-gal)的活性上调。本试剂盒以x-gal为底物,在衰老相关β-半乳糖苷酶的催化作用下形成蓝色产物,从而在光学显微镜下***察到变成蓝色的衰老细胞。本试剂盒可以用于培养细胞和组织切片的衰老检测。
染色步骤:
(一)冰冻切片
1、冰冻切片,滴加4%***(pfa),室温固定5分钟;
2、纯水洗涤3次,每次5分钟;
3、疏水笔画圈(稍大点);
4、纯水洗涤3次,每次1分种;
5、滴加sa-beta-gal染色液(100ul/圈);
6、37?c染色过液2-24小时,镜下观察。
7、染色结束后,纯水洗涤3次,每次2分钟;
8、核固红复染细胞核(选做);
9、水性封片剂封片。
(二)细胞样本
1、培养细胞去除培养液后,pbs洗2次,4%pfa室温固定5分钟;
2、pbs洗3次,pfa尽量去除干净;
3、加sa-beta-gal染色液(1.5-2ml/35mmdish);
4、37?c染色2-24小时,镜下观察;
5、染色结束后,pbs洗涤3次;
6、培养皿中留少许pbs,镜下拍照。
注意事项:
1、染色液应现配现用。
2、染色12小时后,如无蓝色的阳性着色,可延长染色时间至24小时。
3、组织样品后固定效果较好。即***行oct速冻包埋,切片后再用4%pfa进行固定。
4、衰老相关β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的ph值,不能用于细胞培养的co2培养箱中进行染色反应。因为co2培养箱中较高浓度的co2会影响染色工作液的ph值,导致染色失败。
5、本试剂盒适合各种类型和规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm培养皿和各种孔数的细胞培养板,只需按照一定的比例调整工作液用量即可。
6、需自备pbs或hbss(hanksbalancedsaltsolution)

更多:β-半乳糖苷酶报告***试剂盒 
http://www.bi-gene.com/products-36080363.html 
https://www.chem17.com/st431186/product_36080363.html
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