贝克曼红细胞裂解液

红细胞裂解液是一种比较温和的红细胞去除方法。几部损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含

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    2023-02-10 11:35

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红细胞裂解液是一种比较温和的红细胞去除方法。几部损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞,可进一步用于原代细胞培养、细胞日平和、核酸与蛋白的分离和提取等。

红细胞裂解的原理

红细胞表面上有红细胞专属的表面抗原,当裂解液中含可以攻击特定红细胞表面细胞抗原的酶的时候,就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大、膨胀、裂解,而不会攻击其他细胞。另外红细胞有自己的电负性、渗透脆性、悬浮稳定性、这都是区别于其他种类细胞的区别点。红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的。

红细胞裂解液的使用说明

1. 1倍体积的新鲜全血,加入3倍体积的红细胞裂解液。如1ml新鲜全血加入3ml红细胞裂解液,轻轻涡旋或颠倒混匀。    2. 冰上放置15分钟,其间轻轻涡旋混匀两次,红细胞裂解后,溶液应该是清亮透明的。    3. 收集细胞:4℃,450×g离心10分钟以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。    4. 向白细胞沉淀中加入两倍体积的红细胞裂解液,轻轻涡旋充分重悬白细胞。如起始血液为1ml,则加入2ml的红细胞裂解液。    5. 4℃,450×g离心10分钟沉淀白细胞,小心并*吸去上清液。    6. 重悬细胞,用于后续实验;如提取RNA,*于此步开始使用DEPC水配制的溶液进行操作。

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